S12020链亲和素
介绍:链亲和素(SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)表达的一种小分子蛋白。本制品为127AA核心结构,每分子SA结合4个生素分子,国际比活性12~15U/mg。SA与禽类亲和素(Avidin,AV)相比特异性更强,与生素结合后半衰期长达6h,而AV半衰期仅为1h。由于SA不含糖基且等电点接近中性,因此SA在检测应用中具有比AV更低的非特异性背景。
用途:本制品已广泛应用于制备SA-偶联酶制剂(如SA-HRP,SA-AP等),SA-偶联荧光素(即荧光染料,如SA-FITC,SA-Cy2,SA-Cy3等)、SA-偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附检测(ELISA)、免疫组化、亲和色谱填料、含StrepTagII标签(8-AA寡肽)的蛋白纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究、生物芯片被料等生物技术领域。
优点:高亲和力,高偶联效率。
S12020链亲和素注意事项:
1.冻干粉溶解后应避免反复冻融,建议分装成小包装后分别冻存。
2.冻干粉中含20mMNa2CO3 pH9.5的缓冲体系,若用于包被,酶标可以直接使用。若用于胶体金,调节pH或透析后使用。溶解后立即使用效果好,不能4℃长期存放。
3.若用于ELISA包板,胶体金烘金,硝酸纤维素膜上用SA划线后需要烘干保存,包被液或缓冲液中需加入20%蔗糖作为活性保护剂。
【操作步骤简述】
一、微孔板包被
1、用碳酸钠缓冲溶液(pH 9.6)溶解冻干粉,将浓度稀释成3-10ug/ml(客户可设定梯度进行实验)
注意:由于SA等电点是7.4,包被不建议使用中性缓冲液
2、用移液器吸取100ul/孔,4℃过夜包被或者37℃包被2h
3、洗涤:倒尽板孔中液体,加200ul洗涤液,静放三分钟,反复三次,z后将反应板倒置在吸水纸上,使孔中洗涤液流尽,扣干
4、后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程
若不立即进入下游实验,包被板需要进行烘干保存时。包被前,将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。
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S12020链亲和素